A lo largo de tu formación seguro que has estudiado la técnica de la electroforesis. Recuerda que es una técnica para separar, principalmente, proteínas y ácidos nucleicos, pero que en el caso de la inmunoelectroforesis se utiliza para después realizar una doble inmunodifusión. La inmunoelectroforesis permite detectar sustancias con movilidad eléctrica similar mediante reacciones de precipitación específicas entre antígenos y anticuerpos. Es útil cuando las mezclas de antígenos son demasiado complejas para ser analizadas por difusión y precipitación simples, por ejemplo en el caso de inmunoglobulinas del suero donde sería difícil la identificación de cada banda. La inmunoelectroforesis tiene mucho poder de resolución pero no se considera una técnica de rutina.

Se realiza en agar o agarosa sobre portaobjetos, la muestra es la solución con la mezcla antigénica y se deposita en un pocillo central, mientras que el antisuero se coloca lateralmente en un surco.

 

Como se puede observar en esta imagen, la técnica tiene dos fases bien definidas:

1. Electroforesis, para separar los componentes antigénicos de la muestra que se ha depositado en el pocillo central. El pH del gel se selecciona de forma que las proteínas con carga negativa migren al ánodo o polo positivo. En el caso de muestras séricas, las proteínas suelen separarse en cinco regiones, ordenadas desde el ánodo al cátodo o polo negativo de la siguiente manera: Albúmina, alfa-1-globulinas, alfa-2-globulinas, beta-globulinas y gamma-globulinas. Las gamma-globulinas, por un fenómeno de electroendósmosis , migran hacia el cátodo.
2. Doble inmunodifusión de las proteínas separadas previamente por la electroforesis y del antisuero situado en el surco, en el caso anterior el antisuero  tendría anti- albumina, anti- alfa2globulina, anti beta globulina  ademas de anti- IgG., anti-IgM y anti-IgA, y se colocaría lateralmente al recorrido electroforético.

Las bandas de precipitación tienen forma de arco, y se pueden teñir y comparar con las de un suero estándar o con el antígeno que se quiera identificar en la muestra.

En la imagen puedes ver una inmunoelectroforesis correspondiente a un caso de mieloma múltiple, una IgG con cadenas kappa. La técnica permite caracterizar la paraproteína gracias a los arcos de inmunoprecipitación formados contra antisueros específicos de cadenas pesadas y cadenas ligeras.

A la derecha de la inmunoelectroforesis se indican los antisueros utilizados. Para cada antisuero, en la parte superior se analiza una muestra del mismo paciente y, en la parte inferior, un suero control (NHS).

Se señalan los engrosamientos localizados en los arcos de precipitación correspondientes a los antisueros anti-IgG y anti-kappa. Esta intensa reacción anormal con anti-IgG y anti-kappa, y la falta de reacción con el antisuero contra las cadenas lambda, indican la presencia de una paraproteína monoclonal (IgG con cadenas kappa) ya que una inmunoglobulina policlonal reaccionaría con los dos tipos de antisueros anti-cadenas ligeras (anti-kappa y anti-lambda). La ausencia de una banda para anti-IgM y la presencia de una banda reducida para anti-IgA demuestran la típica reducción de inmunoglobulinas normales en esta enfermedad.

Entre las aplicaciones más importantes de la inmunoelectroforesis cabe destacar la caracterización de alteraciones cualitativas de proteínas específicas, por ejemplo, tal como se ha visto en un caso anterior, inmunoglobulinas monoclonales en mielomas, y el análisis de mezclas complejas de proteínas en fluidos biológicos.