¿Qué pasaría si una vez se han separado las proteínas de una mezcla, se añadiera un anticuerpo específico contra una de ellas? Como verás ahora, en esto se basa la inmunofijación. Es una técnica de detección de proteínas que consiste en su separación electroforética en gel seguida de la incubación con un antisuero específico. En la zona en donde reaccionan antígeno y anticuerpo se forman bandas de precipitación insolubles. Las proteínas que no han precipitado se eliminan por lavado y las bandas de precipitación se revelan con una tinción para proteínas que permite su visualización.

En la imagen puedes observar una inmunofijación que muestra el componente IgG-kappa monoclonal en un caso de amiloidosis (1) y su posterior desaparición después de ocho meses de tratamiento (2). El canal ELP corresponde al canal de electroforesis positivo (sin inmunofijación), y los canales G, A, M, K y L corresponden, respectivamente, a la aplicación de antisueros anti-IgG, anti-IgA, anti-IgM, anti-kappa y anti-lambda.

En el apartado anterior se vió como la inmunoelectroforesis puede ser utilizada para el diagnóstico del mieloma múltiple que también es una gammapatía monoclonal  pero actualmente está siendo la inmunofijación la técnica diagnóstica más utilizada para el estudio de esta patología:

El mieloma,como hemos visto es una  proliferación anómala de células plasmáticas malignas que producen en exceso una de las cadenas pesadas( de las moléculas de Ig (γ, α, µ ; que se corresponden con inmunoglobulinas G, A o M respectivamente) y en exceso un tipo cadena ligera (κ, λ) (paraproteínas).

• Se sigue el siguiente proceso en la realización de la técnica de inmunofijación:
• El suero problema se dispone en 5 carriles diferentes, y posteriormente se somete a electroforesis en un gel de agarosa.
• En un sexto carril se coloca un suero control, que permite la visualización del perfil completo de las proteínas séricas.
• Cada uno de los carriles restantes se cubre con un antisuero específico frente a las cadenas pesadas y ligeras humanas γ, α, µ, κ, λ.
• Cuando el antisuero con  anti-γ, anti-α, anti-µ, anti-κ, o anti-λ reconoce al Ag ( cadenas pesdas y ligeras) específico, se forma un precipitado que queda atrapado en el gel.
• Se lava para eliminar las proteínas no precipitadas y se tiñe para revelar las que han formado inmunocomplejos. Así se identifica el tipo de paraproteína.
• En la mayoría de los pacientes con mieloma múltiple se aprecia una producción excesiva de las cadenas ligeras (λ o κ) por parte de las células plasmáticas malignas, cuyo peso molecular es lo suficientemente bajo para permitir su excreción a través de la orina. Estas cadenas ligeras se denominan proteínas de Bence-Jones.