Materiales y reactivos:
- Cubetas de tinción.
- Solución alcohólica fijadora número 1. Disolución metílica de triarilmetano.
- Solución de colorante ácido número 2. Disolución tamponada de santeno.
- Solución de colorante básico número 3. Disolución tamponada de tiazina.
Muestra:
- Extensión sanguínea.
Fundamento:
Las distintas estructuras celulares adquieren coloración diferente dependiendo de su afinidad por los colorantes utilizados.
Procedimiento:
- Se coloca cada colorante en una cubeta de tinción.
- Sumergir las preparaciones durante 5 segundos, realizando 5 inmersiones de 1 segundo cada una en la disolución colorante número 1 y escurrir.
- Sumergir las preparaciones durante 5 segundos, realizando 5 inmersiones de 1 segundo cada una en la disolución colorante número 2 y escurrir de nuevo.
- Sumergir finalmente las preparaciones durante 5 segundos, realizando 5 inmersiones de 1 segundo cada una en la disolución colorante número 3 y escurrir.
- Lavar con agua y dejar secar.
TINCIÓN DE GIEMSA
Materiales y reactivos:
- Cubetas de tinción.
- Tampón PBS.
- Colorante Giemsa.
Muestra:
Extensión sanguínea.
Fundamento:
Las distintas estructuras celulares adquieren coloración diferente dependiendo de su afinidad por los colorantes utilizados.
Procedimiento:- Fijar el frotis con alcohol metílico absoluto durante 3 minutos.
- Preparar en un tubo de ensayo una solución con una proporción de 1 a 9 con Giemsa y tampón PBS. Es decir 1 mililitro de colorante Giemsa y 9 mililtros de PBS.
- Cubrir las extensiones con la mezcla anterior durante 10 minutos.
- Lavar el portaobjetos con agua.
- Dejar secar.
TINCIÓN DE WRIGHT
Materiales y reactivos:
- Cristalizador.
- Barras paralelas.
- Pipetas Pasteur con chupete.
- Frasco lavador.
- Guantes.
- Solución de eosina y azul de metileno según Wright.
- Tampón PBS.
Muestra.
Extensión sanguínea.
Fundamento.
El colorante utilizado es una solución de eosina y una mezcla de azul de metileno y azur B Junto con otros derivados del alcohol metílico. Dada la presencia de metanol en la composición, no es necesario un paso previo de fijación antes de la coloración.
Procedimiento.
- Colocar los portaobjetos con las extensiones sobre las barras paralelas.
- Verter sobre la extensión aproximadamente un mililitro del colorante de Wright.
- Dejar actuar durante un minuto.
- Añadir un volumen igual (1 mililitro) de agua destilada o tampón PBS y mezclar soplando con cuidado sobre el portaobjetos.
- Dejar actuar durante 3 minutos aproximadamente.
- Lavar bien con agua o con solución tampón PBS.
- Escurrir y secar a temperatura ambiente en posición vertical.