3.2.- Inoculación de medios líquidos y semisólidos.

En la imagen se pueden ver las manos del técnico abriendo un tubo que contiene una muestra líquida. Se puede ver la manera de sujetar el tapón agarrándolo con los dedos no utilizados para sostener el asa en la mano dominante.

La inoculación de medios líquidos se utiliza muchas veces en microbiología para realizar pruebas de identificación bioquímica a partir de las colonias aisladas que se quieren estudiar.

A continuación aprenderás los distintos procedimientos de siembra que están relacionados con el manejo de tubos.

  • Para sembrar un caldo a partir de un inóculo líquido: Puedes utilizar como instrumentos de siembra un asa, un hisopo o una pipeta estéril.
    • Tras homogenizar la muestra, sostén el tubo con tu mano no dominante, retira el tapón y toma el inóculo introduciendo asépticamente el instrumento de siembra elegido, en el tubo.
    • Cierra el tubo tras la operación.
    • Coge el medio estéril en el que vas a sembrar y realiza la transferencia del inóculo, introduciendo el instrumento de siembra en el tubo. Agita con cuidado el tubo para diseminar el inóculo.
    • Descarta el hisopo, la pipeta o esteriliza el asa de siembra utilizada.
  • Para inocular un caldo a partir de un inóculo sólido: Puedes utilizar un asa o un hilo de siembra para transferir la muestra. El hilo de siembra es una herramienta similar al asa, con sus mismas características (se calienta y enfría rápidamente) pero no tiene un anillo en el extremo.
    • Tras tomar la muestra en condiciones asépticas, puedes agitar el asa dentro del tubo para que el inóculo se desprenda o puedes depositarlo en las paredes internas del tubo, inclinándolo unos 30º. Seguidamente vuelve a colocar el tubo en su posición original. El área de inoculación quedará de esta manera sumergida.
  • En el caso que quieras inocular un medio semisólido: Toma el inóculo utilizando un hilo de siembra. Transfiérelo realizando una punción en el centro del medio de cultivo e introduciendo la punta del hilo hasta 2 o 3 mm del fondo del tubo. Seguidamente extrae el hilo y esterilízalo. A este tipo de siembra se le denomina siembra por picadura.

Existen una serie de reglas básicas que debes seguir en todos los procedimientos de siembra y que te ayudarán a que te salgan bien.